細菌培養實驗室是微生物實驗室里面的配套實驗室,細菌培養室用人工方法(使其在合適的溫度,濕度,光照度,PH值,潔凈度等環境下,使細菌生長繁殖,培養出來的細菌用于研究、鑒定和應用。廣泛用于醫藥研究。
室內要求無菌操縱,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響.細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔,空氣清新,干燥和無煙塵.細胞培養室的設計原則一般是無菌操縱區設在室內較少走動的內側,常規操縱和封閉培養于一室,而洗刷消毒在另一室.與其他一般實驗室工作的主要區別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。一般標準的細胞培養室應包括配液室、準備室和培養室。三室既相互連接又相對獨立,各自完成培養過程中的不同操作。
細胞培養實驗室的設置
細胞培養實驗室應能進行六方面的工作:無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。
植物細胞培養實驗室設置
1.基本實驗室
1.1洗滌間
根據工作量的大小決定其大小,一般面積控制在30-50m2。在實驗室的一側設置專用的洗滌水槽,用來清洗玻璃器皿。中央實驗臺還應配置2個水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以購置一臺洗瓶機。準備1-2個洗液缸,專門用于洗滌對潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等。地面應耐濕并排水良好。
1.2培養基配制間
面積60平方米左右,配備的主要儀器設備有:冰箱、天平、微波爐、pH計、培養基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規格的培養瓶、培養皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲藏瓶等。冰箱以體積180-200L為宜,用于儲存培養基母液、激素維生素等貴重藥品、彩色膠卷、及保存植物材料。天平應有不同感量。
1.3消毒間
配備實驗臺、高壓滅菌鍋、排風滅火設備、細菌過濾設備、干熱消毒柜、電爐等。滅菌鍋的選擇應根據不同的要求選擇不同型號的滅菌鍋。一般實驗室可選用小型的醫用手提式高壓滅菌鍋,較大的實驗室可選用立式自動控制壓力和溫度的滅菌鍋。生產性的實驗室可選用大型的臥式滅菌鍋。
如果沒有條件的話,可以將上述工作間合并成一個準備間,要求是設備的安裝和排列要合理、房間要寬敞、明亮、透風,地面要便于清潔、防滑。
1.4無菌操作室
無菌操作室主要用于實驗材料的接種操作,所以又叫接種室。通常由里外兩間組成,外間是緩沖間,用于準備工作,還有防止污染的作用。緩沖間的門應該與接種室的門錯開,兩個門也不要同時開啟,以保證無菌室不因開門和人的進出帶進雜菌。
緩沖間內應該設有水槽、實驗臺、鞋帽架、和柜子、紫外燈。無菌操作室的內壁應當用塑鋼板或瓷磚裝修,工作人員進入操作間前要穿上消過毒的工作服和拖鞋。室內應配有超凈工作臺,紫外燈、解剖鏡、各種接種器械等。
1.5培養室
為了控制培養室的溫度和光照時間及其強度,培養室的房間不要窗戶,但應當留一個通氣窗,并安上排氣扇。室內溫度由空調控制,光照由日光燈控制。天花板和內墻***好用塑料鋼板裝修,地面用水磨石或瓷磚鋪設,一般要分兩間,一為光照培養室,一為暗培養室。培養室外應有一預備間或走廊。
培養室應配有培養架、轉床、搖床、光照培養箱、生化培養箱、自動控時器等。日光燈一般用40W,固定在培養架的側面或擱板的下面,每層有兩支日光燈,距離在20cm,光照強度為2000-3000lx。
2.輔助實驗室
2.1鑒定室
細胞學鑒定室其功能是對培養材料進行細胞學鑒定和研究。要求清潔、明亮、干燥,使各種光學儀器不受潮濕和灰塵污染。應配置各種顯微鏡、照相系統等。生化分析室在以培養細胞產物為主要目的的實驗室中,應建立相應的分析化驗實驗室,以便于對培養物的有效成分隨時進行取樣檢查。離心機、酶聯免疫檢測儀、天平、PCR儀等。2.2、溫室用于試管苗的鍛煉和移植,為試管苗提供滿足生長的適宜環境條件。常用設備有:溫室、彌霧裝置、蔭棚、移栽床、缽、盆、基質等.
2.動物細胞培養實驗室設置
無菌條件:凈化工作室,風淋室,傳遞窗,高效過濾器,潔凈層流罩,生物安全柜,超凈工作臺,紫外燈,電熱干燥箱,濾器,高壓滅菌器,抗生素。
細胞生長條件:純水蒸餾器,純水儀,培養板,培養瓶,CO2培養箱,培養基,血清細胞檢測條件:倒置顯微鏡,酶標儀,微孔板震蕩器,高速離心機,移液器。
細胞保存條件:液氮罐實驗室準備間緩沖間培養室。
實驗室的要求
①和緩沖間相連,緩沖間內備消毒服裝和鞋,口罩等,入內換上
②設置1—2臺超凈工作臺
③室內空氣不流通,有適當的光線,清潔,干燥
④側部可設傳遞窗,用于物品傳遞
⑤照明用熒光燈為好,消毒用紫外線燈
⑥在室內工作時,動作應輕微準備間內設備
①大、小水槽②消毒設備③消毒后的物品和器械保藏柜④烘箱
⑤蒸餾器(包括雙蒸,三重蒸餾水)⑥玻璃器皿,培養液等⑦電爐等
注意:
①配制溶液要用新鮮的純水,配制過程避免交叉感染
②設備排列緊湊
③指定一處可暫放不污及有毒物質準備間設備
CO2培養箱:37度+/-0.5度;能調節溫度和CO2濃度
消毒器:高壓鍋,蒸汽滅菌鍋,干燥消毒箱
冰箱:4度或-20度家用冰箱,保存一般制劑;-70度保存蛋白制劑
水質純化裝置:凈化水質用于清洗或配制培養液
另外:顯微鏡,離心機,酸度計,天平,液氮罐、真空泵等。